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体育游戏app平台 范例品:6 管 0.3mL-开云官网切尔西赞助商(2025已更新(最新/官方/入口)
发布日期:2025-07-11 06:38    点击次数:129

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在科研限制体育游戏app平台,准确检测东说念主 I 型胶原卵白(ColⅠ)的浓度至关迫切。东说念主 I 型胶原卵白(ColⅠ)酶联免疫试剂盒,就如同科研东说念主员手中的过劲器具,助力咱们深化探索其中的普遍。

一、要道信息

试剂盒提供 96T 和 48T 两种规格选拔,保质期为 6 个月(具体以试剂盒外包装标签为准)。它主要用于体外定量检测血清、血浆或其他联系生物液体中东说念主 I 型胶原卵白的浓度。其聪惠度可达 0.1 ng/mL,能精确识别样本中的东说念主 I 型胶原卵白,与类似物险些无交叉响应,特异性精致。在类似性方面,板内和板间变异整个均小于 15%,检测领域为 1.25 ng/mL – 40 ng/mL。需要明确的是,该试剂盒仅用于科研,严禁用于临床会诊、挽回、食物或药品等限制。

二、检测旨趣伸开剩余84%

试剂盒摄取双抗体夹心法进行检测。最初,将抗东说念主 I 型胶原卵白(ColⅠ)抗体包被在酶标板上,为后续响应搭建 “舞台”。当加入样品或范例品时,其中的东说念主 I 型胶原卵白会与包被抗体引诱,接着加入辣根过氧化物酶记号的抗体,变成抗体 - 抗原 - 酶标抗体复合物。响应完成后进行洗板,去除游离要素。然后加入显色底物(TMB),在辣根过氧化物酶的催化下,TMB 呈现蓝色,加入断绝液后变为黄色。心机浅深与样品中东说念主 I 型胶原卵白的浓度呈正联系,通过酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),就能计算出样品浓度。

三、试剂盒构成

试剂盒的各个构成部分协同职责,确保检测胜利进行:

微孔酶标板:有 96 孔(12 孔 ×8 条)和 48 孔(12 孔 ×4 条)两种设置,是响应的发生地。 范例品:6 管 0.3mL,浓度从高到低按序为 40、20、10、5、2.5、1.25 ng/mL,用于绘画范例弧线。 稀释液:96 孔设置为 6mL,48 孔设置为 3mL,用于稀释样本。 检测抗体 - HRP:96 孔设置 10mL,48 孔设置 5mL,厚爱与抗原引诱并传递信号。 20× 洗涤缓冲液:两种设置均为 25mL,使用时需用双蒸水或去离子水按 1:19 稀释,用于清洗响应板。 底物 A 和底物 B:96 孔和 48 孔设置别离为 6mL 和 3mL,在检测中阐述显色作用。 断绝液:96 孔和 48 孔设置均为 6mL 和 3mL,用于断绝响应。 封板膜:2 张,用于封住响应孔,防患贬抑。 证明书:1 份,细心先容实验措施和从容事项。 自命袋:1 个,用于临时保存未用完的板条。

使用时要旋紧试剂瓶盖,防患挥发和微生物贬抑,试剂实践体积以发货为准,使用时应量取。

四、自备实验物品

进行实验需要准备以下物品:

酶标仪(450nm):用于测量吸光度,赢得实验数据。 高精度加样器及枪头:包括 0.5 - 10uL、2 - 20uL、20 - 200uL、200 - 1000uL 等规格,确保加样准确。 37℃恒温箱:为实验提供顺应的温度环境。 蒸馏水或去离子水:用于稀释试剂。 五、样品网络阵势

不同类型的样品,网络阵势有所不同:

血清:全血样品室温舍弃 2 小时或 4℃过夜,2000prm 转速离心 20 分钟,取上清检测。网络血液需用一次性无内毒素试管。 血浆:用 EDTA 钠盐抗凝,样品网络后 30 分钟内,2000prm 转速离心 15 分钟,取上清检测。幸免使用溶血、高血脂样品。 组织匀浆:用预冷的 PBS(0.01M,pH = 7.4)冲洗组织,去除残留血液,称重剪碎后,按 1:9 的分量体积比(可凭说明验调度并记载,保举在 PBS 中加入卵白酶羁系剂)与 PBS 搀杂,在冰上充分研磨。可超声破灭或反复冻融进一步裂解细胞,5000prm 转速离心 5 - 10 分钟取上清。 细胞提真金不怕火液:贴壁细胞用冷的 PBS 清洗,胰卵白酶消化后 2000prm 转速离心 5 分钟网络;悬浮细胞径直离心网络。网络的细胞用冷的 PBS 洗涤 3 次,每 1×10⁶ 个细胞加 150 - 200μL PBS 重悬,反复冻融破灭细胞(含量低可减少 PBS 体积),2000prm 转速离心 10 分钟取上清。 细胞培养上清或其他生物体液:2000prm 转速离心 20 分钟,取上清检测。 六、样品从容事项 保存与处分:样品网络后 1 周内检测可存于 4℃,不然按一次用量分装,冻存于 - 20℃以下,幸免反复冻融。溶血标本会影响检测成果,不宜使用。 浓度调度:若样品中检测物浓度高于范例品最高值,需凭说明践情况符合稀释(查阅文件后先作念预实验详情稀释倍数)。 烦躁因素:使用化学裂解液制备样品可能导致测值偏差,某些重组卵白可能与试剂盒抗体不匹配而无法检测。 七、检测前准备 均衡温度:将试剂盒及样本从雪柜取出后,需在室温(25 - 28ºC)下均衡 120 分钟,以达到最好气象。每次检测后剩余试剂应实时放回 4ºC 保存。 配制洗涤液:将 20X 洗涤液用双蒸水或去离子水按 1:19 稀释,如 10ml 20X 洗涤液加 190ml 水混匀,得到 1X 洗涤液。 八、操作措施 准备板条:计算所需预包被板条数,取出舍弃在 96 孔框架内,剩余板条密封放回 4ºC。 均衡试剂和样本:试剂盒和样本在室温(25 - 28ºC)均衡 120min。 竖立响应孔:竖立范例品孔、样本孔和空缺孔。 加样:范例品孔各加 50μL 不同浓度范例品;样本孔加 50μL 待测样本;空缺孔加 50μL 样本稀释液。 温育响应:各孔加 100μL 辣根过氧化物酶(HRP)记号的检测抗体,封板膜封住,37℃温育 60min。 洗板:弃去液体,吸水纸拍干,每孔加 350μL 洗涤液,静置 20s 后甩去,类似 5 次(也可用洗板机)。 加底物:每孔加底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。 断绝响应与读数:每孔加 50μL 断绝液,15min 内在 450nm 波所长测定各孔 OD 值。 九、成果分析 复孔有用性:复孔值相反在 15% 领域内成果有用,复孔平均值手脚测量值。 纠正吸光度:每个范例品或样品的吸光度值需减去本底纠正孔的吸光度值(无纠正孔则无需减)。 绘画范例弧线:以范例品浓度为横坐标,A450 值为纵坐标,用平滑线聚积各点。通过样品吸光度值和范例弧线(直线拟合)计算样品浓度(可使用职责主说念主员提供的计算软件)。 高浓度处分:若样品 OD 值高于范例弧线上限,需符合稀释后重测,计算浓度时乘以稀释倍数。 十、从容事项 加样表率:加样时每个样品或范例品皆要更换枪头,防患交叉贬抑,幸免吸取体积流毒。 批号不可混用:不同批号的试剂盒组份不成混用,每批试剂盒皆经过寂寞测试。 温度限制:试剂盒许多操作在室温(22 - 28ºC)进行,温度低于 22ºC 会使吸光度显赫下落。 洗涤迫切性:洗涤经由至关迫切,不充分会镌汰精确度,导致成果流毒大。 使用为止:本居品仅限专科东说念主员科研使用,不得用于临床、食物或药品等限制,操作时需穿实验服并戴一次性手套。

通过以上先容体育游戏app平台,但愿科研东说念主员能更好地掌抓东说念主 I 型胶原卵白(ColⅠ)ELISA KIT 的使用阵势,为科研职责提供有劲复旧。

发布于:湖北省

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